1. 胰島素的生產方法有哪些提取 胰臟提取
你好
1.提取目的基因:
既從人的DNA中提取胰島素基因,可使用限制性內切酶將目的基因從原DNA中分離.
2.提取質粒:
使用細胞工程,培養大腸桿菌,從大腸桿菌的細胞質中提取質粒,質粒為環狀.
3.基因重組:
取出目的基因與質粒,先利用同種限制性內切酶將質粒切開,再使用DNA連接酶將目的基因與質粒"縫合",形成一個能表達出胰島素的DNA質粒.
4.將質粒送回大腸桿菌:
再大腸桿菌的培養液中加入含有Ca+的物質,如CaCl2,這使細胞會吸收外源基因.此時將重組的質粒也放入培養液中,大腸桿菌便會將重組質粒吸收.
5.胰島素的產生:
再大腸桿菌內,質粒通過表達轉錄與翻譯後,便產生出胰島素蛋白質.通過大腸桿菌的大量繁衍,便可大量生產出胰島素!
可以借閱高中生物選修1,其中基因工程單元有詳細介紹
2. 注射用胰島素如何生產
一般都是生物合成人胰島素,通過基因重組技術,利用酵母產生的。
3. 生物工程生產胰島素的步驟.想解決目的基因如何獲取
1,目的基因的獲取:通過各種手段(基因文庫,化學合成,PCR技術等)獲取胰島素基因
2,基因表達載體的構建:一般採用質粒,用同一種限制酶切割質粒和切取目的基因(胰島素基因)使產生相同的粘性末端,將切取的胰島素基因片段插到質粒的切口處,再用DNA連接酶使質粒和胰島素基因結合成重組質粒
3,將重組質粒導入受體細胞(如大腸桿菌,用感受態細胞法即Ca+處理)
4,檢測與鑒定目的基因獲得途徑:
1限制性內切酶酶切法
2利用PCR技術直接擴增目的基因
3目的基因的化學合成
4通過構建基因組文庫或CDNA文庫分離目的基因
5反向轉錄法分離目的基因
希望對你有幫助.
4. 人工合成胰島素是什麼技術
1921年,加拿大多倫多大學的弗雷德里克·班廷和查爾斯·貝斯特從狗的體內分離出一種活性物質——胰島素。他們把這種物質注入一條患有糖尿病、瀕臨死亡的狗身上,這條狗的病情很快就出現了好轉。
第二年,他們在一名生命垂危的14歲男孩子身上嘗試類似的實驗成功後,這種激素進入大規模生產。盡管它不能徹底治癒糖尿病,但它是一種重要的救命葯物。
人工合成蛋白質是人們嚮往已久的,也是人類向生物活性、向生命進軍的首要方向。蛋白質如果能通過人工合成,那麼,它的意義將不僅僅是找到了無機與有機、無生命與有生命的物質之間的關系,而且,將進一步揭示和證實關於生命、靈魂等許多重大問題的認識。由於一些多肽和蛋白質的化學結構,特別是胰島素的一級結構被陸續認識,通過人工方法合成具有生物活性的多肽和蛋白質的任務,就擺在了世界各國的科學工作者的面前。
就在世界各國的科學家把目光聚集在蛋白質的人工合成問題上時,1958年,中國科學院上海生物化學研究所、上海有機化學研究所以及北京大學的科學家鄒承魯、鈕經義、龔岳亭、汪猷、邢其毅等眾多科學家聯合攻關,向科學高峰發起了沖擊。
大家知道,1958年在中國歷史上是一個特殊的年代,在一個政治上處於困境、技術上缺乏基礎的艱苦環境中,中國的科學家要攻克生命禁區的堡壘談何容易!科學家的實驗所用去的化學溶劑足以灌滿一個游泳池,而他們在那些不分晝夜的日子裡所灑下的汗水,又何嘗不能灌滿一個游泳池!
1959年,在各位科學工作者的合力協作下,實現了構成天然胰島素的A、B兩條肽鏈的拆分和重新組合的工作。在此基礎上,北京大學生物系在國內率先合成了具有生物活性的9肽——催產素。接著中國科學院化學研究所和北京大學化學系組織了協作組,經過若干年的艱苦努力,終於在1965年獲得了人工合成的牛胰島素,並製成結晶。這是世界上第一次用人工方法合成的一種具有生物活性的蛋白質,在科學技術和哲學上都具有極其重要的意義,而且為醫葯工業合成比天然產物更為有效的多肽抗生素、激素等葯物開辟了廣闊的前景。
發現胰島素的班廷
人工合成蛋白質的成功,是人類在認識生命、揭開生命奧秘的征途上向前跨進了重要一步。它標志著人工合成蛋白質的時代已經開始了。
人工合成牛胰島素的成功,說明人類在研究生命的歷程中又邁出了一大步。由人工合成胰島素派生的活性多肽研究也蓬蓬勃勃地發展起來了。已經人工合成的,除了催產素、增血壓素、加壓素類似物外,還有促黃體素釋放激素、促甲狀腺素釋放激素、胰高血糖素等多肽激素。此外,蛋白質的結構與功能的研究也在深入探索中。
5. 胰島素生產方法有什麼方法可以低成本大量提取的嗎
1.提取目基: 既DNA提取胰島素基,使用限制性內切酶目基原DNA離. 2.提取質粒: 使用細胞工程,培養腸桿菌,腸桿菌細胞質提取質粒,質粒環狀. 3.基重組: 取目基與質粒,先利用同種限制性內切酶質粒切,再使用DNA連接酶目基與質粒"縫合",形能表達胰島素DNA質粒. 4.質粒送腸桿菌: 再腸桿菌培養液加入含Ca+物質,CaCl2,使細胞吸收外源基.重組質粒放入培養液,腸桿菌便重組質粒吸收. 5.胰島素產: 再腸桿菌內,質粒通表達轉錄與翻譯,便產胰島素蛋白質.通腸桿菌量繁衍,便量產胰島素! 借閱高物選修1,其基工程單元詳細介
6. 胰島素可通過發酵技術產生嗎
發酵:通過微生物的培養而獲得產物的過程。發酵制葯種類:(1)微生物菌體發酵(2)微生物酶發酵(3)微生物代謝產物發酵(4)微生物轉化發酵
胰島素可通過發酵技術產生?——這種說法是不正確的。只能說「重組大腸桿菌的高密度發酵是提高基因工程產品產量的一個非常有效的手段「,是現代發酵工程研究的一個熱點。大腸桿菌本身沒有人胰島基因.通過基因工程,把人胰島基因導入大腸桿菌,得到「工程菌」,才能夠大量生產人的胰島素。
重組人胰島素是第一個應用於臨床的基因工程葯物,於1982年上市。由於胰島素沒有糖鏈,大腸桿菌系統生產有2條途徑。目前以第二條路線為主。
第一條、是分別在大腸桿菌中合成A鏈和B鏈,然後通過化學氧化作用把2條鏈連接起來形成胰島素。A和B鏈基因分別與半乳糖苷酶基因連接,形成融合基因,發酵生產包涵體融合蛋白。用CNBr切除Met-肽鍵,使A、B鏈與載體蛋白分開。化學法連接,折疊得到有活性的重組人胰島素。步驟多,產量低,活性受到限制。
第二條、是生產胰島素原,然後再酶水解,形成胰島素。用強啟動子高表達載體生產,如色氨酸啟動子等。