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工業上用什麼方法去除核酸

發布時間:2022-10-25 07:19:25

『壹』 酵母核糖核酸的分離和鑒定。實驗原理

一、 實驗目的

1、掌握酵母RNA提取的方法。

2、了解核酸的組成。

3、掌握鑒定核酸組分的方法和操作。

二、 實驗原理

酵母核酸中RNA含量較多,DNA則少於2%。RNA可溶於鹼性溶液,當鹼被中和後,可加乙醇使其沉澱,由此即可得到RNA製品。但是用鹼液提取的RNA有不同的降解。RNA含有核糖、嘌呤鹼、嘧啶鹼和磷酸等組分,加入硫酸煮沸可使其水解,從水解液中可以測出上述組分的存在(見實驗內容)

三、 實驗步驟

1、 用托盤天平稱1g乾酵母於研缽中,加入少許石英砂,再加入2ml 0.04mol/LNaOH溶液,在研缽中充分研磨至少5min。

2、 再加4ml 0.04mol/LNaOH溶液於勻漿液中,混勻後,將勻漿液轉移到大試管中,再用4ml 0.04mol/LNaOH溶液洗滌研缽,洗滌液並入勻漿液中。

3、 將大試管小心在沸水浴中加熱30min,冷卻後倒入離心管中,與另一組同學的離心管在托盤天平上平衡,然後兩組的離心管對稱地放入離心機中,2000r/min下離心15min。

4、 吸取10ml酸性乙醇溶液於小燒杯中,將離心管上清液小心倒入小燒杯中,邊倒入邊攪拌,直到RNA沉澱完全。

5、 將小燒杯中的液體倒入2個干凈的離心管,平衡、離心(2000r/min)3min。

6、 棄去兩離心管上清液,各離心管中加入95%乙醇2.5ml,振盪、混勻、平衡、離心(2000r/min)3min。

7、 棄去兩離心管上清液,各離心管加入3ml 1.5mol/L硫酸,混勻、倒入同一個大試管中,貼上標簽,放在試管架上,備用。

8、 將水解液在沸水浴中加熱至少10min,使沉澱RNA充分水解。

9、 取一支試管A,加入1ml 0.1mol/L硝酸銀溶液,再逐滴加入濃氨水至沉澱消失,然後加入1ml水解液放置片刻,觀察有無白色嘌呤鹼的銀化合物沉澱。

10、 另取一支試管B,加入水解液1ml,三氯化鐵濃鹽酸溶液2ml和地衣酚乙醇溶液0.2ml(約4滴),混勻,用試管夾夾好後放到沸水浴中3~5min,注意觀察溶液是否變成綠色,說明核糖的存在。

11、 再取一支試管C,加入水解液1ml和定磷試劑1ml,混勻,在沸水浴中加熱,注意觀察溶液顏色的變化,溶液變藍,說明磷酸存在。

注意事項:離心一定要平衡對稱放入離心機中,離心機達到設置轉速時才能離開。

四、 實驗結果

第6步中離心管底部有不少的RNA沉澱。

試管A:出現白色渾濁現象。有嘌呤鹼存在。

試管B:加熱後,出現鮮綠色,且隨著加熱時間延長,顏色越來越深。有核糖存在。

試管C:加熱後,出現藍色,且隨著加熱時間延長,顏色越來越深。有磷酸存在。

說明RNA的組分中有嘌呤鹼、核糖、磷酸。

分析:

本實驗選用酵母,是因為酵母中RNA含量較多,且價格便宜。RNA可溶於鹼性溶液,所以本實驗用0.04mol/LNaOH溶液來提取。RNA不溶於乙醇,可用酸性乙醇使RNA從溶液中沉澱出來,再用乙醇洗滌沉澱,可得到RNA粗製品。

研磨和NaOH使酵母細胞破裂,RNA主要存在於細胞質中,所以RNA被釋放出來,同時,NaOH使蛋白質變性。

加入酸性乙醇,一方面可以中和NaOH,另一方面,使RNA從溶液中沉澱下來。

RNA含有核糖、嘌呤鹼、嘧啶鹼和磷酸等組分,加入硫酸煮沸可使其水解,從水解液中可以測出上述組分的存在。

(1)、強酸使核酸分子的有機磷消化為無機磷,使之與鉬酸銨結合成磷鉬酸銨(黃色沉澱)
PO43- + 3NH4+ + 12MoO42- + 24H+ ===(NH4)3PO4.12MoO3.6H2O + 6H2O

當有還原劑(如維生素C)存在時,Mo6+被還原成Mo4+,再與試劑中的其它MoO42-結合成Mo(MoO4)2,呈藍色,稱鉬藍。所以試管C中會出現藍色。

(2)、RNA與硫酸共熱,生成的核糖進而脫水轉化為糠醛,三氯化鐵作為催化劑,可與地衣酚反應,生成綠色化合物,所以試管B中出現綠色。(OR苔黑酚)

(3)、嘌呤鹼可與硝酸銀反應產生白色的飄零銀化合物沉澱。所以試管A中出現渾濁現象。

(4)、不檢測嘧啶鹼,是因為與嘌呤鹼相比,它難以被水解下來,同時它難檢測且現象不明顯。

(1)工業上用什麼方法去除核酸擴展閱讀

酵母核酸提取原理

提取和制備RNA 的首要問題是選RNA 含量高的材料。微生物是工業上大量生產核酸的原料,其中RNA 的提制以酵母最為理想,因為酵母核酸中主要是RNA(2.67~10.0%),DNA 很少(0.03~0.516%),而且菌體容易收集,RNA 也易於分離。

RNA 提制過程首先要使RNA 從細胞中釋放,並使它和蛋白質分離,然後將菌體除去。再根據核酸在等電點時溶解度最小的性質,將pH 調至2.0~2.5,使RNA 沉澱,進行離心收集。然後運用RNA 不溶於有機溶劑乙醇的特性,以乙醇洗滌RNA 沉澱。

提取RNA 的方法很多,在工業生產上常用的是稀鹼法和濃鹽法。濃鹽法是在加熱的條件下,利用高濃度的鹽改變細胞膜的透性,使RNA 釋放出來,此法易掌握,產品顏色較好。

使用濃鹽法提出RNA 時應注意掌握溫度,避免在20~70℃之間停留時間過長,因為這是磷酸二酯酶和磷酸單酯酶作用的溫度范圍,會使RNA 因降解而降低提取率。在90~100℃條件下加熱可使蛋白質變性,破壞磷酸二酯酶和磷酸單酯酶,有利於RNA 的提取。

『貳』 簡述核酸分離的基本 原理

通過機械磨碎細胞或加入表面活性劑裂解細胞使內容物提取出來,再加入蛋白變性劑變性沉澱蛋白質。最後靠核酸在醇溶液中溶解度下降的特點提取純的核酸。

『叄』 生物分離高手進

這寫起來復雜了....... 很多地方都有這樣的實驗步驟啊,我看了一下 下面這個,還可以
酶的分離簡單,就是麻煩,時間挺長的

酶的分離純化方法簡介
生物細胞產生的酶有兩類:一類由細胞內產生後分泌到細胞外進行作用的酶,稱為細胞外酶。這類酶大都是水解酶,如酶法生產葡萄糖所用的兩種澱粉酶,就是由枯草桿菌和根酶發酵過程中分泌的。這類酶一般含量較高,容易得到;另一類酶在細胞內產生後並不分泌到細胞外,而在細胞內起催化作用,稱為細胞內酶,如檸檬酸、肌苷酸、味精的發酵生產所進行的一系列化學反應,就是在多種酶催化下在細胞內進行的,在類酶在細胞內往往與細胞結構結合,有一定的分布區域,催化的反應具有一定的順序性,使許多反應能有條不紊地進行。
酶的來源多為生物細胞。生物細胞內產生的總的酶量雖然是很高的,但每一種酶的含量卻很低,如胰臟中期消化作用的水解酶種類很多,但各種酶的含量卻差別很大。
因此,在提取某一種酶時,首先應當根據需要,選擇含此酶最豐富的材料,如胰臟是提取胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、澱粉酶和脂酶的好材料。由於從動物內臟或植物果實中提取酶制劑受到原料的限制,如不能綜合利用,成本又很大。目前工業上大多採用培養微生物的方法來獲得大量的酶制劑。從微生物中來生產酶制劑的優點有很多,既不受氣候地理條件限制,而且動植物體內酶大都可以在微生物中找到,微生物繁殖快,產酶量又豐富,還可以通過選育菌種來提高產量,用廉價原料可以大量生產。
由於在生物組織中,除了我們所需要的某一種酶之外,往往還有許多其它酶和一般蛋白質以及其他雜質,因此為製取某酶制劑時,必須經過分純化的手續。
酶是具有催化活性的蛋白質,蛋白質很容易變性,所以在酶的提純過程中應避免用強酸強鹼,保持在較低的溫度下操作。在提純的過程中通過測定酶的催化活性可以比較容易跟蹤酶在分離提純過程中的去向。酶的催化活性又可以作為選擇分離純化方法和操作條件的指標,在整個酶的分離純化過程中的每一步驟,始終要測定酶的總活力和比活力,這樣才能知道經過某一步驟回收到多少酶,純度提高了多少,從而決定著一步驟的取捨。

酶的分離純化一般包括三個基本步驟:即抽提、純化、結晶或制劑。首先將所需的酶從原料中引入溶液,此時不可避免地夾帶著一些雜質,然後再將此酶從溶液中選擇性地分離出來,或者從此溶液中選擇性地除去雜質,然後製成純化的酶制劑。下面就酶的分離純化的常用方法作一綜合介紹:
一、預處理及固液分離技術
1.細胞破碎(cell disruption)
高壓均質器法:此法可用於破碎酵母菌、大腸菌、假單胞菌、桿菌甚至黑麴黴菌。將細胞懸浮液在高壓下通入一個孔徑可調的排放孔中,菌體從高壓環境轉到低壓環境,細胞就容易破碎。菌懸液一次通過均質器的細胞破碎率在12%-67%。細胞破碎率與細胞的種類有關。要達到90%以上的細胞破碎率,起碼要將菌懸液通過均質器兩次。最好是提高操作壓力,減少操作次數。但有人報道,當操作壓力達到175Mpa時,破碎率可達100%。當壓力超過70Mpa時,細胞破碎率上升較為緩慢。高壓均質器的閥門是影響細胞破碎率的重要因素。絲狀菌會堵塞均質器的閥門,尤其高濃度菌體時更是如此。在豐富培養基上比在合成培養基上生長的大腸菌更難破碎。
容菌酶處理法:蛋清中含有豐富的溶菌酶,價格便宜,常用來裂解細胞。具體做法是:溶壁微球菌(micrococcus lysodeikticus)43kg,置於0.5%的氯化鈉溶液中,使細胞濃度為5%(乾重),在35℃用0.68kg(乾重)的蛋清處理20min,得到的細胞碎片用相同體積的乙醇處理,用離心機將細胞碎片和胞內蛋白質除去,再將乙醇濃度提高到75%(體積分數),可以得到純度為5%的過氧化氫酶1500g。
2.離心
離心分離過程可分為離心過濾、離心沉澱、離心分離3種類型,所使用的設備有過濾式離心機、沉降式離心機和離心機。過濾式離心機的轉鼓壁上開有小孔,壁上有過濾介質,一般可用於處理懸浮固體顆粒較大、固體含量較高的場合。沉降式離心機用於分離固體濃度較低的固液分離,如發酵液中的菌體,用鹽析法或有機溶劑處理過的蛋白質等。分離機用於分離兩種互不相溶的、密度有微小差別的乳濁液或含微量固體微粒的乳濁液。
在生物領域採用的離心機系統,除了應具備離心機的一般要求外,還應滿足生物生產的技術要求,這包括滅菌、冷卻、密封,以保證產品不受污染並不污染環境。現代哦離心機裝置包括以下三個步驟,並進行程序控制:離心、離心系統的滅菌及就地清洗。如阿法-拉伐公司離心機產品的裝置,具有雙重軸向密封,密封由裝在轉筒主軸上下的碳化硅動環和固定環組成,密封由水連續冷卻和潤滑,可防止產品被污染,也可防止生產過程中排出的廢物對環境的污染。該離心機又如一個密閉的壓力容器,可在121℃溫度下進行蒸汽滅菌,該離心設備設有環繞離心機轉筒的冷卻夾套,對懸浮液和濃縮的固體都能進行充分的冷卻,並能有效地控制溫度,這對於生物製品是非常重要的。如BTPX205型離心機可用於細胞收集、培養液的凈化和細胞碎片的分離,可用於疫苗、酶制劑等的提取。該機的其他輔助系統及控制系統也較為完善,如設有壓力指示器、力量計、溫度感測器和液面感測器。
3.膜分離技術
在蛋白質純化過程中主要用到的膜分離技術多為超濾。在靜壓作用下降溶液通過孔徑非常小的濾膜,使溶液中分子量較小的溶質透過薄膜,而大分子被截留於膜表面。大多數超濾膜是由一層非常薄的功能膜與較厚的支撐膜結合在一起而組成的。功能膜決定了膜的孔徑,而支撐膜提供機械強度以抵抗靜壓力。超濾濃縮的優點是:操作條件溫和,無相變化,對生物活性物質沒有破壞。
超濾系統主要由料液貯罐、泵、超濾器、透過液收集罐組成,料液經泵打入超濾器,水及低分子量物質排出超濾器外,被濃縮的料液在料液貯罐、泵、及超濾器中循環。當料液濃縮至一定的倍數後即可作為進一步處理的濃縮料液。
超濾應用於蛋白質類物質的濃縮和脫鹽過程中時應注意以下問題:第一,在超濾循環過程中,由於泵和葉輪與料液的摩擦放熱作用,料液的溫度會逐漸升高,會造成蛋白質分子的損失。因此,料液貯罐應加冷卻系統,並安裝自動測溫及控制系統。第二,某些酶的輔助因子散失為問題:一些酶含有輔助因子,其分子量小,超濾時易從透過液中排除掉,因而在超濾前或超濾後要添加一定濃度的的輔助因子。
還可將超濾與親和層析相結合以提高分離純度。其工作原理是:當溶液中欲被分離的蛋白質不受阻礙地通過超濾膜的孔隙時,如果在膜的一側結合著親和配基,該蛋白質就會與配基結合因而結聚在膜的這一側。不與配基結合的其他物質就將穿過孔而被帶走。再用適宜的洗脫劑將該蛋白質洗脫下來,洗脫液用於進一步的分離純化。
4.泡沫分離
原理:將氣體通入含多種組分的溶液中,由於這些組分的表面活性由差異,因此在溶液的表面,某些組分將形成泡沫,泡沫的穩定性取決於操作條件及溶液的生物學特性。泡沫中含有更多的表面活性成分,故泡沫的組分種類及其含量與溶液中的不相同。這樣,溶液中的組分舅得以分離。
蛋白質較易吸附與氣液界面,這有利於其結構的穩定。泡沫分離過程是:蛋白質從主體溶液中擴散到氣液界面,該過程可能是可逆的也可能是不可逆的;分子發生重排,一般認為在空氣-水界面會形成兩種類型的膜,一種是稀膜,另一種是濃膜,可能會發生由多個分子聚集在一起的現象。在氣液界面形成的蛋白質膜可以是單層的也可以是多層的。膜的類型取決於主體溶液及氣液界面上蛋白質的特性、結構和濃度。
泡沫分離的目的,一方面提高酶蛋白的富集率(泡沫中蛋白質的濃度/最初溶液中蛋白質濃度),另一方面提高酶蛋白的提取率(泡沫中蛋白質的提取率/最初的蛋白質質量),或使多組分混合物中某一組分的分配系數最大。

二、抽提
沉澱
1. 鹽析
常用的鹽析劑是硫酸銨,其溶解度大、價格便宜。硫酸銨沉澱蛋白質的能力很強,其飽和溶液能使大多數的蛋白質沉澱下來。對酶沒有破壞作用。
pH的控制:應從酶的溶解度與穩定性兩個方面考慮,在酶等電點時其溶解度最小易沉澱,但有些酶再等電點時穩定性較差,因此要選擇最佳pH值.一般要求在酶最穩定的pH值的前提下再考慮最適宜酶沉澱的pH值。在操作中一旦確定最佳pH值後,在添加硫酸銨之前甲酸或鹼調節好酶液的pH值,要盡量避免溶液pH值的波動以免破壞酶的穩定性。在添加硫酸銨時要注意攪拌,並注意硫酸銨的加入速度,一般是由少到多,緩慢加入,硫酸銨盡可能磨成細粉。
溫度的控制:有些酶在較高溫度下穩定性能較好,可在常溫下進行鹽析操作,而對於大多數酶,盡可能在低溫下操作。
酶液的凈置:加完硫酸銨後,酶液要靜置一段時間,使酶蛋白完全沉澱下來,酶靜置後,就不要再加以攪拌。
2.有機溶劑沉澱
有機溶劑選擇:可用於酶蛋白沉澱的有機溶劑包括醇類物質等,如甲醇、乙醇、異丙醇。乙醇的親水性能較好,可防止蛋白質的變性,酶蛋白在其中的溶解度也較低。
有機溶劑沉澱操作:有機溶劑一般都使蛋白質變性,當溫度較高時變性蛋白質分子就會變成永久失活。因此用有機溶劑處理時最好在0℃以下進行。用有機溶劑沉澱得到的酶蛋白不要放置過久,要盡快加水溶解。
3.聚合物絮凝劑沉澱
聚合物絮凝劑,如葡聚糖和聚乙二醇,與酶分子爭奪水分子,具有脫水作用使酶沉澱。聚乙二醇作為一種沉澱劑的優點是在水溶液中,其濃度可達到50%,濃度為6%-12%的蛋白質大都可以沉澱下來。這種試劑不需要低溫操作,而且對蛋白質的穩定還有一定的保護作用。聚乙二醇不會被吸附,故在離子交換吸附前不必去除。
4.用金屬離子和絡合物沉澱
酶和其他蛋白質都會形成金屬鹽,其溶解度較低。用金屬離子沉澱的缺點是酶與金屬離子相互作用後,可逆變化較差,尤其是用巰基衍生物,它結合的]金屬離子會催化酶變性而失活。
5.用特殊試劑沉澱法
用鏈黴素可選擇性去除核酸,從而使胞內酶沉澱出來。鏈黴素鹽(濃度為0.5-1.0mg/mg蛋白質)對於選擇性沉澱核酸的效果比錳離子還要好,酶不易失活。
6.親和沉澱
將親和反應的高度選擇性、低處理量特性與沉澱操作的大處理量、地選擇性有機結合形成了親和沉澱技術。將配基與可溶性載體偶聯後形成載體-配基復合物,該復合物與生物分子結合後在一定條件下可以沉澱出來。
配基-載體復合物可以選擇性地與蛋白質結合,溶液中的pH值、離子強度及蛋白質濃度等條件對親和結合的影響力並不大,只有競爭性的配基會降低產物與原配基的親和結合力,甚至使親和結合發生逆轉。
引導產生沉澱的方法有:離子交聯;加入帶相反電荷的聚合物;加入帶相反電荷的疏水基團;改變pH值,誘導產生疏水沉澱;溫度誘導產生沉澱。
親和結合:將親和配基加入到含有目的物蛋白質的溶液中,調節好有關沉澱的條件,使之有利於親和結合。
洗滌:為經過處理的粗製液中發生親和沉澱可能會發生非特異性結合,尤其是使用帶電的聚合物,離子交換的效應將使其他蛋白質共同沉澱,因此在分離目的物之前要洗滌沉澱物。其做法是:加入適當的清洗劑重新溶解沉澱,再沉澱;或在專一性洗脫之前,徹底清洗沉澱。在上述過程中要始終保持目的蛋白質與配基處於親和結合狀態。
配基-載體復合物與目的蛋白質的分離:分離結束之後,要確保回收目的蛋白質和配基-載體復合物,目的蛋白質要達到一定的純度,回收率要高。

『肆』 核酸提取或純化技術主要有哪幾類

核酸提取或純化技術主要有三類:

1、傳統方法(操作復雜,耗時長)

2、離心柱法(試劑盒)

3、磁珠法(可單獨采購磁珠或買成品試劑盒)

其中,磁珠法可實現自動化操作,是目前比較主流的方法。

核酸提取應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業和分子生物學研究等多種領域。



(4)工業上用什麼方法去除核酸擴展閱讀:

核酸提取的注意事項:

1、儀器的安裝環境:正常的大氣壓(海拔高度應該低於3000m)、溫度20-35℃、典型使用溫度25℃、相對濕度10%-80%、暢通流入的空氣為35℃或以下。

2、避免將儀器放置在靠近熱源的地方,如電暖爐;同時為防止電子元件的短路,應避免水或者其他液體濺入其中。

3、進風口和排風口均位於儀器背面,同時避免灰塵或纖維在進風口聚集,保持風道的暢通。

4、核酸提取儀離其他豎直面至少10cm。

5、儀器接地:為了避免觸電事故,儀器的輸入電源線必須接地。

6、遠離帶電電路:操作人員不得擅自拆解儀器,更換元件或進行機內調節必須有持證的專業維修人員完成,不要在接通電源的情況下更換元件。

『伍』 蛋白純化怎麼去除核酸

1、根據所選蛋白的性質,選擇合適的介質和條件,想辦法把蛋白結合在柱子上,(有tag的話用這個方法最好了),然後用高鹽(0.5-3M NaCl)洗,一般會洗下來一個峰,就是被洗下來的核酸了。
2、試試在高鹽條件下加Mn2+,因為高鹽可以讓核酸和蛋白分離,而Mn2+對核酸沉澱有一定的效果。
但是要十分小心的是,這類蛋白本身的天然性質就是要結合核酸的,有的時候核酸去除干凈了,蛋白也沉澱了,所以沒那麼容易,很多小條件要結合所選的蛋白自己去摸索。

『陸』 核酸的分離方法有什麼

核酸(nucleic acid)是遺傳信息的攜帶者,是基因表達的物質基礎.無論是進行核酸結構還是功能研究,首先需要對核酸進行分離和純化.核酸樣品質量將直接關繫到實驗的成敗.核酸分離、純化原則:1.保持核酸分子一級結構的完整性.因為遺傳信息全部儲存在一級結構之中,核酸的—級結構還決定其高級結構的形式以及和其他生物大分子結合的方式.2.分離核酸原則:1)溫度不要過高;2)控制pH值范圍(pH值5-9); 3)保持一定離子強度; 4)減少物理因素對核酸的機械剪切力.
在核酸分離提取中最重要的是要防止核酸的生物降解,細胞內或外來的各種核酸酶能消化核酸鏈中的磷酸二酯鍵,破壞核酸一級結構.所用器械和一些試劑需高溫滅菌,提取緩沖液中需加核酸酶抑制劑.
常用的DNA酶抑制劑有1.金屬離子螯合劑:如EDTA-Na2(乙二胺四乙酸二鈉)、8-羥基喹啉.2.陰離於型表面活性劑如SDS,該試劑除對核酸酶有抑製作用外,還能使蛋白質變性,並與變性蛋白結合成帶負電荷的復合物,該復合物在高鹽溶液中沉澱.
常用的RNA酶(RNAase)抑制劑有:1.皂土(bentonite )作用機制:皂土帶負電荷,能吸附RNase,使其失活.2. DEPC(二乙基焦碳酸鹽) (C2H5OCOOCOOC2H5)粘性液體,很強的核酸酶抑制劑.作用機制:與蛋白質中His結合使蛋白變性.

『柒』 如何除實驗室核酸污染

實驗室去除核酸污染推薦採納歐菲姆OXY-30000的過氧化氫干霧消毒方案,它巧妙地利用了特殊的干霧滅菌設備+諾福過氧化氫殺孢子劑(高純低濃度)的完美配合,組成無懈可擊的空間清潔消毒方案。
而過氧化氫消毒技術當中,據大數據得知,採用全球領先干霧技術打造的歐菲姆OXY-30000消毒機,是行業專業消毒去除PCR核酸污染的佼佼領航者。OXY-30000精妙之處在於其專業的解決方案,避免了過氧化氫蒸汽的腐蝕性以及解決了擴散性問題。其特點為:1、滅菌效果好,生物指示劑挑戰降低6lg對數值,能徹底殺滅環境中的MRSA、VRE、結核分枝桿菌、芽孢、病毒和多重耐葯的革蘭陰性菌(鮑曼不動桿菌);2、活性氫氧基團能氧化DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物質,而諾福過氧化氫殺孢子劑中的活性銀離子,可以抑制DNA聚合酶等有害病菌的生長,從而更有效的防止外源DNA的干擾;
3、1.5小時完成滅菌,人員可進入。預防核酸實驗室環境空氣污染及核酸片氣溶膠污染,及快速高效去除實驗室核酸污染源;4、小於3微米干霧氣體,擴散性優越,能擴散到每一個角落,空氣中做布朗運動,消毒干霧無孔不入,專門對付小分子核酸污染源物質;
具備國際化的CNAS檢測報告和消毒產品備案,可以提供完善的符合歐盟GMP要求的驗證文件和報告。

『捌』 核蛋白中的核酸是怎麼去除的

可以在大腸桿菌裂解的時候就加入核酸酶,通過核酸酶消化胞內的核酸,當核酸變成小片段的時候就很容易被去除掉。 利用陰離子交換層析 Q 來去除核酸,Q柱對於核酸有很強的吸附作用,需要很高的鹽濃度才能洗脫下核酸,可以很容易的去除蛋白溶液中的核酸。 利用分子篩去除核酸,核酸是大分子物質,一般會在分子篩的外水體積中被去除掉。

『玖』 用苯酚處理並離心後RNA溶於上層被酚飽和的水相中,為什麼加入冷乙醇可以析出RNA

於RNA的來源和種類很多,因而提取制備方法也很各異。一般有苯酚法、去污劑法和鹽酸胍法。其中苯酚法又是實驗是最常用的。組織勻漿用苯酚處理並離心後,RNA即溶於上層被酚飽和的水相中,DNA和蛋白質則留在酚層中。向水層加入乙醇後,RNA即以白色絮狀沉澱析出,此法能較好的除去DNA和蛋白質。上述方法提取的RNA具有生性。
工業上常用稀鹼法和濃鹽法提取RNA,用這兩種方法所提取的核酸均為變性的RNA,主要用作制備核苷酸的原料,其工藝比較簡單。濃鹽法使用10%左右氯化鈉溶液,90℃提取3-4h,迅速冷卻,提取液經離心後, 上清液用乙醇沉澱RNA。稀鹼法使用稀鹼使酵母細胞裂解,然後用酸中和,除去蛋白質和菌體後的上清液用乙醇沉澱RNA或調pH2.5利用等電點沉澱。
酵母含RNA達2.67-10.0%,而DNA含量僅為0.03-0.516%,為此,提取RNA多以酵母為原料。
RNA含有核糖、嘌呤鹼、嘧啶鹼和磷酸各組分。加硫酸煮可使RNA水解,從水解液中可用定糖,定磷和加銀沉澱等方法測出上述組份的存在。

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